Platvorm | Raamatukogu suurus | Teoreetiline andmemaht (raku kohta) | Ühe aluse täpsus | Rakendused |
Nanopore | 8Kb, 10kb, 20kb, ülipikk, cDNA-PCR | 70-90 Gb / mobiil | 85-92% | SV kutsumine, de novo, täispikk sekveneerimine, Iso-Seq, geeniannotatsioon, DNA metüülimise tuvastamine |
● Üle 5-aastane kogemus PacBio sekveneerimisplatvormil tuhandete suletud projektidega erinevate liikidega.
● BMKGENE on Oxford Nanopore'i ametlik partner, millel on kahe platvormi RNA/DNA sertifikaat.
● On olemas täieliku varustuse ja piisava järjestuse läbilaskevõimega sekvenaatorite tavamudelid.
● Nanopore'i platvormi põhjal on rahvusvaheliselt tunnustatud ajakirjades avaldatud üle 10 Denovo loomade ja taimede uurimistöö.
Proovi tüüp | Summa | Kontsentratsioon (Qubit ®) | Helitugevus | Puhtus | teised |
Genoomne DNA | Olenevalt andmenõudest | ≥20ng/μl | ≥15 μl | OD260/280 = 1,7-2,2; OD260/230≥1,5; Selge tipp 260 nm juures, saaste puudub | Kontsentratsiooni tuleb mõõta Qubit ja Qubit/Nanopore ≤ 2 abil |
Kogu RNA | ≥1,2 μg | ≥100 μg/μl | ≥15 μl | OD260/280 = 1,7-2,5; OD260/230=0,5-2,5;saaste puudub | RIN väärtus ≥7,5 |
DNA proovi andmete kvaliteedi hindamine
Tabel 1. Puhaste andmete statistika.
BMKID | rawSeqNum | rawSumBase | cleanSeqNum | cleanSumBase | puhasN50Len | puhasN90Len | cleanMeanLen | cleanMaxLen | cleanMeanQual |
DNA_BMK01 | 1 218 239 | 26.37 | 1 121 736 | 25.90 | 28 014 | 15 764 | 23 090 | 143 181 | 9 |
RNA proovi andmete kvaliteedi hindamine
Tabel 1. Puhaste andmete statistika.
Faili nimi | Kliendi ID | ReadNum | Põhiarv | N50 | Keskmine pikkus | Maksimaalne pikkus | Keskmine Qskoor |
RNA_BMK001 | C2 | 8 947 708 | 4 047 230 083 | 398 | 452 | 129 227 | Q12 |
Joonis 1. Lugege pikkusjaotust
Joonis 2. Puhaste andmete kvaliteediskoori jaotus
Joonis 3. Puhaste andmete pikkus- ja kvaliteediskoorijaotus