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Secuenciación de circRNA-Illumina

La secuenciación de ARN circular (circRNA-seq) consiste en perfilar y analizar ARN circulares, una clase de moléculas de ARN que forman bucles cerrados debido a eventos de empalme no canónicos, lo que proporciona a estos ARN una mayor estabilidad.Si bien se ha demostrado que algunos ARNcirc actúan como esponjas de microARN, secuestrando microARN e impidiéndoles regular sus ARNm objetivo, otros ARNcirc pueden interactuar con proteínas, modular la expresión genética o desempeñar funciones en procesos celulares.El análisis de la expresión de circRNA proporciona información sobre las funciones reguladoras de estas moléculas y su importancia en diversos procesos celulares, etapas de desarrollo y enfermedades, lo que contribuye a una comprensión más profunda de la complejidad de la regulación del ARN en el contexto de la expresión génica.


Detalles del servicio

Bioinformática

Resultados de la demostración

Publicaciones destacadas

Características

● Agotamiento del ARNr seguido de la preparación de la biblioteca direccional, lo que permite secuenciar datos específicos de cada cadena.

● El flujo de trabajo bioinformático permite la predicción y cuantificación de la expresión del ARN circular

 

Ventajas del servicio

Bibliotecas de ARN más completas:Utilizamos el agotamiento del ARNr en lugar del agotamiento lineal del ARN en nuestra preparación previa a la biblioteca, lo que garantiza que los datos de secuenciación incluyan no solo el ARNcirc, sino también el ARNm y el ARNlnc, lo que permite el análisis conjunto de estos conjuntos de datos.

Análisis opcional de redes competitivas de ARN endógeno (ARNce): proporcionando conocimientos más profundos sobre los mecanismos reguladores celulares

Amplia experiencia: con un historial de procesamiento de más de 20 000 muestras en BMK, que abarca diversos tipos de muestras y proyectos de lncRNA, nuestro equipo aporta una gran experiencia a cada proyecto.

Control de calidad riguroso: implementamos puntos de control centrales en todas las etapas, desde la preparación de muestras y bibliotecas hasta la secuenciación y la bioinformática.Este seguimiento meticuloso garantiza la entrega de resultados consistentes de alta calidad.

● Soporte posventa: Nuestro compromiso se extiende más allá de la finalización del proyecto con un período de servicio postventa de 3 meses.Durante este tiempo, ofrecemos seguimiento del proyecto, asistencia para la resolución de problemas y sesiones de preguntas y respuestas para abordar cualquier consulta relacionada con los resultados.

Requisitos de muestra y entrega

Biblioteca

Plataforma

Datos recomendados

Control de calidad de datos

Poli A enriquecido

Iluminación PE150

16-20 GB

Q30≥85%

Requisitos de muestra:

Nucleótidos:

Conc.(ng/μl)

Cantidad (μg)

Pureza

Integridad

≥ 100

≥ 0,5

DO260/280=1,7-2,5

DO260/230=0,5-2,5

En el gel se muestra contaminación limitada o nula de proteínas o ADN.

Para plantas: RIN≥6,5;

Para animales: RIN≥7,0;

5,0≥28S/18S≥1,0;

elevación basal limitada o nula

● Plantas:

Raíz, Tallo o Pétalo: 450 mg

Hoja o Semilla: 300 mg

Fruta: 1,2 gramos

● Animales:

Corazón o Intestino: 450 mg

Vísceras o Cerebro: 240 mg

Músculo: 600 mg

Huesos, Cabello o Piel: 1,5g

● Artrópodos:

Insectos: 9g

Crustáceos: 450 mg

● Sangre entera:2 tubos

● Celdas: 106 células

● Suero y Plasma: 6ml

Entrega de muestra recomendada

Envase: tubo de centrífuga de 2 ml (no se recomienda papel de aluminio)

Etiquetado de muestras: Grupo+réplica, por ejemplo, A1, A2, A3;B1, B2, B3... ...

Envío:

1. Hielo seco: las muestras deben empaquetarse en bolsas y enterrarse en hielo seco.

2. Tubos RNAstable: las muestras de ARN se pueden secar en un tubo de estabilización de ARN (por ejemplo, RNAstable®) y enviarse a temperatura ambiente.

Flujo de trabajo del servicio

Control de calidad de muestra

Diseño de experimentos

entrega de muestra

Entrega de muestra

experimento piloto

extracción de ARN

Preparación de la biblioteca

construcción de biblioteca

Preparación de la biblioteca

Secuenciación

Análisis de los datos

Análisis de los datos

Servicios postventa

Servicios postventa


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  • Bioinformática

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    Predicción de circRNA: distribución cromosómica

     foto 36

     

    CirRNA expresados ​​diferencialmente: diagrama de volcán

     foto 37

     

    CirRNA expresados ​​diferencialmente: agrupación jerárquica

     foto 38

     

    Enriquecimiento funcional de los genes del huésped de circRNA.

     foto 39

     

     

    Explore los avances en la investigación facilitados por los servicios de secuenciación de circRNA de BMKGene a través de una colección seleccionada de publicaciones.

     

    Wang, X. et al.(2021) 'CPSF4 regula la formación de circRNA y el silenciamiento de genes mediado por microRNA en el carcinoma hepatocelular', Oncogene 2021 40:25, 40(25), págs.doi: 10.1038/s41388-021-01867-6.

    Xia, K. y col.(2023) 'El transcriptoma sensible a X oo revela el papel del ARN133 circular en la resistencia a enfermedades mediante la regulación de la expresión de OsARAB en el arroz', Phytopathology Research, 5 (1), págs.doi: 10.1186/S42483-023-00188-8/FIGURAS/6.

    Y, H. et al.(2023) 'CPSF3 modula el equilibrio de transcripciones circulares y lineales en el carcinoma hepatocelular'.doi: 10.21203/RS.3.RS-2418311/V1.

    Zhang, Y. et al.(2023) 'Evaluación integral de los ARNcirc en la miocardiopatía cirrótica antes y después del trasplante de hígado', Inmunofarmacología internacional, 114, p.109495. doi: 10.1016/J.INTIMP.2022.109495.

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