Η αλληλουχία mRNA υιοθετεί την τεχνική αλληλούχισης επόμενης γενιάς (NGS) για τη σύλληψη του αγγελιοφόρου RNA (mRNA) από τον Ευκαρυώτη σε συγκεκριμένη περίοδο που ενεργοποιούνται ορισμένες ειδικές λειτουργίες.Η μακρύτερη μεταγραφή που ματίστηκε ονομαζόταν «Unigene» και χρησιμοποιήθηκε ως η ακολουθία αναφοράς για επακόλουθη ανάλυση, η οποία είναι ένα αποτελεσματικό μέσο για τη μελέτη του μοριακού μηχανισμού και του ρυθμιστικού δικτύου του είδους χωρίς αναφορά.
Μετά τη συγκρότηση δεδομένων μεταγραφής και τον λειτουργικό σχολιασμό unigene
(1)Η ανάλυση SNP, η ανάλυση SSR, η πρόβλεψη CDS και η γονιδιακή δομή θα προδιαμορφωθούν.
(2) Θα πραγματοποιηθεί ποσοτικοποίηση της έκφρασης μονογονιδίου σε κάθε δείγμα.
(3) Διαφορικά εκφραζόμενα μονογονίδια μεταξύ δειγμάτων (ή ομάδων) θα ανακαλυφθούν με βάση την έκφραση μονογονιδίων
(4) Θα πραγματοποιηθεί ομαδοποίηση, λειτουργικός σχολιασμός και ανάλυση εμπλουτισμού διαφορικά εκφραζόμενων unigenes