Επισκόπηση του Hi-C
(Lieberman-Aiden E et al.,Επιστήμη, 2009)
● Δεν χρειάζεται να δημιουργηθεί γενετικός πληθυσμός για συνεχή αγκύρωση.
● Υψηλότερη πυκνότητα δείκτη που οδηγεί σε υψηλότερη αναλογία αγκυρώσεως σε άνω του 90%.
● Επιτρέπει την αξιολόγηση και τις διορθώσεις σε υπάρχοντα συγκροτήματα γονιδιώματος.
● Συντομότερος χρόνος περιστροφής με μεγαλύτερη ακρίβεια στη συναρμολόγηση του γονιδιώματος.
● Άφθονη εμπειρία με περισσότερες από 1000 βιβλιοθήκες Hi-C που κατασκευάστηκαν για περισσότερα από 500 είδη.
● Πάνω από 100 επιτυχημένες υποθέσεις με σωρευτικό δημοσιευμένο συντελεστή αντίκτυπου πάνω από 760.
● Συναρμολόγηση γονιδιώματος με βάση Hi-C για πολυπλοειδές γονιδίωμα, ποσοστό αγκύρωσης 100% επιτεύχθηκε σε προηγούμενο έργο.
● Εσωτερικές πατέντες και πνευματικά δικαιώματα λογισμικού για πειράματα Hi-C και ανάλυση δεδομένων.
● Λογισμικό συντονισμού οπτικοποιημένων δεδομένων που έχει αναπτυχθεί μόνος του, που επιτρέπει τη χειροκίνητη μετακίνηση, αντιστροφή, ανάκληση και επανάληψη μπλοκ.
Τύπος βιβλιοθήκης
|
Πλατφόρμα | Διάβασε το μήκος | Πρόταση στρατηγικής |
Hi-C | Illumina NovaSeq | ΠΕ150 | ≥ 100Χ |
● Έλεγχος ποιότητας ακατέργαστων δεδομένων
● Έλεγχος ποιότητας βιβλιοθήκης Hi-C
● Συγκρότημα γονιδιώματος με βάση Hi-C
● Αξιολόγηση μετά τη συναρμολόγηση
Ζώο | Μύκητας | Φυτά
|
Κατεψυγμένος ιστός: 1-2g ανά βιβλιοθήκη Κελιά: 1x 10^7 κελιά ανά βιβλιοθήκη | Κατεψυγμένος ιστός: 1g ανά βιβλιοθήκη | Κατεψυγμένος ιστός: 1-2g ανά βιβλιοθήκη
|
*Συνιστούμε ανεπιφύλακτα την αποστολή τουλάχιστον 2 κλασμάτων (1 g το καθένα) για το πείραμα Hi-C. |
Δοχείο: Σωλήνας φυγοκέντρησης 2 ml (δεν συνιστάται αλουμινόχαρτο)
Για τα περισσότερα δείγματα, συνιστούμε να μην διατηρείται σε αιθανόλη.
Επισήμανση δειγμάτων: Τα δείγματα πρέπει να φέρουν σαφή σήμανση και να είναι πανομοιότυπα με το υποβληθέν δείγμα φόρμας πληροφοριών.
Αποστολή: Ξηρός πάγος: Τα δείγματα πρέπει πρώτα να συσκευάζονται σε σάκους και να ταφούν σε ξηρό πάγο.
*Τα αποτελέσματα επίδειξης που εμφανίζονται εδώ είναι όλα από γονιδιώματα που δημοσιεύθηκαν με τη Biomarker Technologies
1.Χάρτης θερμότητας αλληλεπίδρασης Hi-C τουCamptotheca acuminataγονιδίωμα.Όπως φαίνεται στον χάρτη, η ένταση των αλληλεπιδράσεων συσχετίζεται αρνητικά με τη γραμμική απόσταση, η οποία υποδηλώνει ένα εξαιρετικά ακριβές συγκρότημα σε επίπεδο χρωμοσώματος.(Αναλογία αγκύρωσης: 96,03%)
Kang M et al.,Επικοινωνίες για τη φύση, 2021
2.Hi-C διευκόλυνε την επικύρωση των αντιστροφών μεταξύGossypium hirsutumL. TM-1 A06 καιΓ. δενδροκομείοΧρ06
Yang Z et al.,Nature Communications, 2019
3. Συναρμολόγηση και διαλληλική διαφοροποίηση του γονιδιώματος της μανιόκας SC205.Ο χάρτης θερμότητας Hi-C δείχνει καθαρό διαχωρισμό σε ομόλογα χρωμοσώματα.
Hu W et al.,Μοριακό φυτό, 2021
4.Χάρτης θερμότητας Hi-C σε συγκρότημα γονιδιώματος δύο ειδών Ficus:F.microcarpa(αναλογία αγκύρωσης: 99,3%) καιF.hispida (αναλογία αγκύρωσης: 99,7%)
Οι Zhang X et al.,Κύτταρο, 2020
Θήκη BMK
Τα γονιδιώματα του δέντρου Banyan και της σφήκας επικονιαστών παρέχουν πληροφορίες για τη συνεξέλιξη σύκου-σφήκα
Δημοσίευσε: Κύτταρο, 2020
Στρατηγική αλληλουχίας:
F. microcarpa γονιδίωμα: Περίπου.84 X PacBio RSII (36,87 Gb) + Hi-C (44 Gb)
F. hispidaγονιδίωμα: Περίπου.97 X PacBio RSII (36,12 Gb) + Hi-C (60 Gb)
Eupristina verticillataγονιδίωμα: Περίπου.170 X PacBio RSII (65 Gb)
Βασικά αποτελέσματα
1.Δύο γονιδιώματα δέντρων banyan και ένα γονιδίωμα σφήκας επικονιαστή κατασκευάστηκαν χρησιμοποιώντας αλληλουχία PacBio, Hi-C και χάρτη σύνδεσης.
(1)F. microcarpaγονιδίωμα: Δημιουργήθηκε ένα συγκρότημα 426 Mb (97,7% του εκτιμώμενου μεγέθους γονιδιώματος) με contig N50 908 Kb, βαθμολογία BUSCO 95,6%.Συνολικά αλληλουχίες 423 Mb αγκυρώθηκαν σε 13 χρωμοσώματα με Hi-C.Ο σχολιασμός του γονιδιώματος απέδωσε 29.416 γονίδια που κωδικοποιούν πρωτεΐνες.
(2)F. Hispidaγονιδίωμα: Ένα συγκρότημα 360 Mb (97,3% του εκτιμώμενου μεγέθους γονιδιώματος) έδωσε απόδοση με contig N50 492 Kb και βαθμολογία BUSCO 97,4%.Συνολικά αλληλουχίες 359 Mb αγκυροβολήθηκαν σε 14 χρωμοσώματα με Hi-C και πανομοιότυπα με τον χάρτη σύνδεσης υψηλής πυκνότητας.
(3)Eupristina verticillataγονιδίωμα: Δημιουργήθηκε ένα συγκρότημα 387 Mb (Εκτιμώμενο μέγεθος γονιδιώματος: 382 Mb) με contig N50 3,1 Mb και βαθμολογία BUSCO 97,7%.
2. Η συγκριτική γονιδιωματική ανάλυση αποκάλυψε μεγάλο αριθμό δομικών παραλλαγών μεταξύ δύοFicusγονιδιώματα, τα οποία παρείχαν ανεκτίμητο γενετικό πόρο για προσαρμοστικές μελέτες εξέλιξης.Αυτή η μελέτη, για πρώτη φορά, έδωσε πληροφορίες για τη συνεξέλιξη σύκου-σφήκα σε γονιδιωματικό επίπεδο.
Διάγραμμα Circos για γονιδιωματικά χαρακτηριστικά δύοFicusγονιδιώματα, συμπεριλαμβανομένων χρωμοσωμάτων, τμηματικών διπλασιασμούς (SDs), τρανσποζόνια (LTR, TEs, DNA TEs), γονιδιακή έκφραση και synteny | Ταυτοποίηση του χρωμοσώματος Υ και υποψηφίου γονιδίου προσδιορισμού φύλου |
Zhang, Χ., et αϊ."Τα γονιδιώματα του δέντρου Banyan και της σφήκας επικονιαστή παρέχουν πληροφορίες για τη συνεξέλιξη Fig-Wasp."Κελί 183.4 (2020).