Die mRNA-Sequenzierung verwendet die Sequenzierungstechnik der nächsten Generation (NGS), um die Boten-RNA (mRNA) aus Eukaryoten zu einem bestimmten Zeitpunkt zu erfassen, zu dem einige spezielle Funktionen aktiviert werden.Das längste gespleißte Transkript wurde „Unigene“ genannt und als Referenzsequenz für die anschließende Analyse verwendet, was ein wirksames Mittel ist, um den molekularen Mechanismus und das regulatorische Netzwerk der Spezies ohne Referenz zu untersuchen.
Nach Zusammenstellung der Transkriptomdaten und unigener funktioneller Annotation
(1) SNP-Analyse, SSR-Analyse, CDS-Vorhersage und Genstruktur werden durchgeführt.
(2) Es wird eine Quantifizierung der unigenen Expression in jeder Probe durchgeführt.
(3) Unterschiedlich exprimierte Unigene zwischen Proben (oder Gruppen) werden basierend auf der Unigenexpression entdeckt
(4)Clustering, funktionelle Annotation und Anreicherungsanalyse von differentiell exprimierten Unigenen werden durchgeführt