Plattform: Illumina NovaSeq-Plattform, PE150
Bibliothekstyp: 350-bp-Insert-cDNA-Bibliothek (abhängig von der Peakverteilung)
Sequenzierungsstrategie: Paired-End 150 bp
Empfohlene Datenmenge: 2 GB Rohdaten/Probe
(1) Qualitätskontrolle der Sequenzierungsdaten: Nukleotidverteilung, Basisqualitätsverteilung, Bewertung des rRNA-Verhältnisses;
(2) Sequenz-Alignment-Analyse: Alignment-Ergebnisstatistik, Sättigung der Sequenzierung, Abdeckung der Sequenzierung;
(3) Annotation des Referenzgenoms (NR, Swiss-Prot, Pfam, COG, GO, KEGG);
(4) Expressionsanalyse: Expressionsverteilung (mit zwei oder mehr Proben), Analyse der Expression zwischen Proben (Venn-Analyse, Korrelationsanalyse, PCA-Analyse);
(5) Differentialausdrucksanalyse (mit zwei oder mehr Proben);
(6) Gen-Set-Analyse: Venn-Analyse, Cluster-Analyse, Funktionsannotationsanalyse (COG, GO, KEGG), Funktionsanreicherungsanalyse (GO, KEGG), Funktionsanreicherungs-Akkorddiagramm, Ipath-Analyse;
(7) sRNA-Analyse: sRNA-Vorhersage, sRNA-Annotation (Blast, sRNAMap, sRNATarBase, SIPHT, Rfam), sRNA-Sekundärstrukturvorhersage, sRNA-Zielgenvorhersage;
(8) Analyse der Transkriptstruktur: Operonanalyse, Vorhersage der Start- und Endstellen der Transkription, UTR-Annotation und -Analyse, Vorhersage der Promotorsequenz, SNP/InDel-Analyse (SNP/InDel-Annotation, SNP/InDel-Regionalverteilung, SNP-Statistiken).