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De-novo-Genomsequenzierung von Pflanzen und Tieren

De NovoUnter Sequenzierung versteht man die Konstruktion des gesamten Genoms einer Art mithilfe von Sequenzierungstechnologien, z. B. PacBio, Nanopore, NGS usw., ohne dass ein Referenzgenom vorhanden ist.Die bemerkenswerte Verbesserung der Leselänge von Sequenzierungstechnologien der dritten Generation hat neue Möglichkeiten bei der Zusammenstellung komplexer Genome eröffnet, beispielsweise solcher mit hoher Heterozygotie, hohem Anteil repetitiver Regionen, Polyploiden usw. Mit Leselängen im Bereich von mehreren zehn Kilobasen ermöglichen diese Sequenzierungs-Lesevorgänge Auflösung sich wiederholender Elemente, Regionen mit abnormalem GC-Gehalt und anderen hochkomplexen Regionen.

Plattform: PacBio Sequel II /Nanopore PromethION P48/Illumina NovaSeq-Plattform


Servicedetails

Demo-Ergebnisse

Fallstudie

Servicevorteile

1Entwicklung-von-Sequenzierung-und-Bioinformatik-in-de-novo-Genomassemblierung

Entwicklung von Sequenzierungsplattformen und Bioinformatik inde novoGenomassemblierung

(Amarasinghe SL et al.,Genombiologie, 2020)

● Konstruktion neuer Genome und Verbesserung bestehender Referenzgenome für interessierende Arten.

● Höhere Genauigkeit, Kontinuität und Vollständigkeit bei der Montage

● Aufbau grundlegender Ressourcen für die Forschung in den Bereichen Sequenzpolymorphismus, QTLs, Genbearbeitung, Züchtung usw.

● Ausgestattet mit dem gesamten Spektrum an Sequenzierungsplattformen der dritten Generation: Komplettlösung für die Genomassemblierung

● Flexible Sequenzierungs- und Assemblierungsstrategien, die verschiedene Genome mit unterschiedlichen Merkmalen erfüllen

● Hochqualifiziertes Bioinformatiker-Team mit großer Erfahrung in komplexen Genomassemblierungen, einschließlich Polyploiden, Riesengenomen usw.

● Über 100 erfolgreiche Fälle mit einem kumulativen veröffentlichten Impact Factor von über 900

● Bearbeitungszeit von nur 3 Monaten für die Genomassemblierung auf Chromosomenebene.

● Solide technische Unterstützung mit einer Reihe von Patenten und Software-Urheberrechten sowohl im experimentellen Bereich als auch in der Bioinformatik.

Leistungsbeschreibung

 

Inhalt

 

 

Plattform

 

 

Leselänge

 

 

Abdeckung

 

Genomuntersuchung

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

≥ 50X

 

 

Genomsequenzierung

 

PacBio Revio

 

15 kb HiFi-Lesevorgänge

 

≥ 30X

 

Hi-C

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

100X

 

 

 

Arbeitsablauf

de novo

Musteranforderungen und Lieferung

Probenanforderungen:

Spezies

Gewebe

Für PacBio

Für Nanopore

Tiere

Viszerale Organe (Leber, Milz usw.)

≥ 1,0 g

≥ 3,5 g

Muskel

≥ 1,5 g

≥ 5,0 g

Blut von Säugetieren

≥ 1,5 ml

≥ 5,0 ml

Blut von Fischen oder Vögeln

≥ 0,2 ml

≥ 0,5 ml

Pflanzen

Frische Blätter

≥ 1,5 g

≥ 5,0 g

Blütenblatt oder Stiel

≥ 3,5 g

≥ 10,0 g

Wurzeln oder Samen

≥ 7,0 g

≥ 20,0 g

Zellen

Zellkultur

≥ 3×107

≥ 1×108

Empfohlene Musterlieferung

Behälter: 2 ml Zentrifugenröhrchen (Alufolie wird nicht empfohlen)
Für die meisten Proben empfehlen wir, sie nicht in Ethanol aufzubewahren.
Probenkennzeichnung: Proben müssen deutlich gekennzeichnet sein und mit dem eingereichten Probeninformationsformular identisch sein.
Versand: Trockeneis: Die Proben müssen zunächst in Beutel verpackt und in Trockeneis vergraben werden.

Service-Workflow

Proben-QC

Experimentdesign

Musterlieferung

Musterlieferung

Pilotversuch

DNA-Extraktion

Bibliotheksvorbereitung

Bibliotheksbau

Sequenzierung

Sequenzierung

Datenanalyse

Datenanalyse

Kundendienst

Kundendienst


  • Vorherige:
  • Nächste:

  • *Die hier gezeigten Demo-Ergebnisse stammen alle von Genomen, die mit Biomarker Technologies veröffentlicht wurden

    1.Circos auf Chromosomenebene GenomassemblierungG. rotundifoliumvon der Nanopore-Sequenzierungsplattform

    3Circos-on-genomische-Merkmale-des-Baumwollgenoms

    Wang M et al.,Molekularbiologie und Evolution, 2021 

    2.Statistik der Assemblierung und Annotation des Weining-Roggengenoms

    4Statistik-der-Genom-Assemblierung-und-Annotation

    Li G et al.,Naturgenetik, 2021

    3.Genvorhersage vonSechium eduleGenom, abgeleitet aus drei Vorhersagemethoden:De novoVorhersage, Homologie-basierte Vorhersage und RNA-Seq-Daten-basierte Vorhersage

    5Gen-Vorhersage

    Fu A et al.,Gartenbauforschung, 2021

    4.Identifizierung intakter langer terminaler Wiederholungen in drei Baumwollgenomen

    6Identifizierung-von-genom-repetitiven-Elementen

    Wang M et al.,Molekularbiologie und Evolution, 2021

    5.Hi-C-Wärmekarte desC. acuminataGenom, das genomweite Gesamtinteraktionen zeigt.Die Intensität der Hi-C-Wechselwirkungen ist proportional zum linearen Abstand zwischen Contigs.Eine saubere gerade Linie auf dieser Wärmekarte weist auf eine äußerst genaue Verankerung von Contigs auf Chromosomen hin.(Contig-Verankerungsverhältnis: 96,03 %)

    7Hi-C-Heat-Map-on-Assembled-Sequencing-Anchoring

    kang M et al.,Naturkommunikation,2021

     

    BMK-Fall

    Eine qualitativ hochwertige Genomassemblierung hebt die genomischen Merkmale und agronomisch wichtigen Gene des Roggens hervor

    Veröffentlicht: Naturgenetik, 2021

    Sequenzierungsstrategie:

    Genomassemblierung: PacBio CLR-Modus mit 20-kb-Bibliothek (497 GB, ca. 63×)
    Sequenzkorrektur: NGS mit 270 bp DNA-Bibliothek (430 Gb, ca. 54×) auf Illumina-Plattform
    Contigs-Verankerung: Hi-C-Bibliothek (560 GB, ca. 71×) auf der Illumina-Plattform
    Optische Karte: (779,55 GB, ca. 99×) auf Bionano Irys

    Wichtigste Ergebnisse

    1. Eine Zusammenstellung des Weining-Roggengenoms wurde mit einer Gesamtgenomgröße von 7,74 GB veröffentlicht (98,74 % der durch Durchflusszytometrie geschätzten Genomgröße).Scaffold N50 dieser Baugruppe erreichte 1,04 GB.93,67 % der Contigs wurden erfolgreich auf 7 Pseudochromosomen verankert.Diese Baugruppe wurde mittels Linkage Map, LAI und BUSCO bewertet, was in allen Bewertungen zu hohen Punktzahlen führte.

    2. Weitere Studien zur vergleichenden Genomik, zur Karte der genetischen Verknüpfung und zur Transkriptomik wurden auf der Grundlage dieses Genoms durchgeführt.Es wurde eine Reihe genomischer Merkmale aufgedeckt, darunter genomweite Genduplikationen und deren Einfluss auf Stärkebiosynthesegene;physikalische Organisation komplexer Prolamin-Loci, Genexpressionsmerkmale, die dem frühen Kopfmerkmal zugrunde liegen, und mutmaßliche domestizierungsassoziierte chromosomale Regionen und Loci im Roggen.

    PB-Volllängen-RNA-Sequenzierungs-Fallstudie

    Circos-Diagramm zu genomischen Merkmalen des Weining-Roggengenoms

    PB-Volllängen-RNA-Alternative-Spleißen

    Evolutions- und Chromosomensyntenieanalysen des Roggengenoms

    Referenz

    Li, G., Wang, L., Yang, J.et al.Eine qualitativ hochwertige Genomassemblierung hebt die genomischen Merkmale und agronomisch wichtigen Gene des Roggens hervor.Nat Genet 53,574–584 (2021).

    https://doi.org/10.1038/s41588-021-00808-z

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