Plošina | Velikost knihovny | Teoretický datový výtěžek (na buňku) | Jednobázová přesnost | Aplikace |
Nanopore | 8Kb, 10kb, 20kb, Ultralong, cDNA-PCR | 70-90 Gb/buňka | 85–92 % | Volání SV, De novo, Sekvenování v plné délce, Iso-Seq, Anotace genu, Detekce metylace DNA |
● Více než 5 let zkušeností se sekvenační platformou PacBio s tisíci uzavřených projektů s různými druhy.
● BMKGENE je oficiálním partnerem Oxford Nanopore s certifikací duální platformy RNA/DNA.
● Existují mainstreamové modely sekvencerů s kompletní výbavou a dostatečnou propustností sekvenování.
● Na základě platformy Nanopore bylo v mezinárodně uznávaných časopisech publikováno více než 10 zvířecích a rostlinných výzkumů Denovo.
Typ vzorku | Množství | Koncentrace (Qubit ®) | Hlasitost | Čistota | Ostatní |
Genomová DNA | Závisí na požadavcích na data | ≥20 ng/μl | ≥15μl | OD260/280=1,7-2,2; OD260/230≥1,5; Jasný pík při 260 nm, žádné kontaminace | Koncentraci je třeba měřit pomocí Qubit a Qubit/Nanopore ≤ 2 |
Celková RNA | ≥1,2 μg | ≥100 μg/μl | ≥15μl | OD260/280=1,7-2,5; OD260/230=0,5-2,5;žádné znečištění | Hodnota RIN ≥7,5 |
Posouzení kvality dat vzorku DNA
Tabulka 1. Statistika čistých dat.
BMKID | rawSeqNum | rawSumBase | cleanSeqNum | cleanSumBase | cleanN50Len | cleanN90Len | cleanMeanLen | cleanMaxLen | cleanMeanQual |
DNA_BMK01 | 1,218,239 | 26,37 | 1,121,736 | 25,90 | 28 014 | 15,764 | 23 090 | 143,181 | 9 |
Hodnocení kvality dat vzorku RNA
Tabulka 1. Statistika čistých dat.
Název souboru | ClientID | ReadNum | BaseNum | N50 | MeanLength | Maximální délka | MeanQscore |
RNA_BMK001 | C2 | 8,947,708 | 4,047,230,083 | 398 | 452 | 129,227 | Q12 |
Obrázek 1. Rozložení délky čtení
Obrázek 2. Rozdělení skóre kvality čistých dat
Obrázek 3. Distribuce skóre délky a kvality čistých dat