De novoсеквенирането се отнася до изграждане на целия геном на вида, използвайки технологии за секвениране, напр. PacBio, Nanopore, NGS и др., при липса на референтен геном.Забележителното подобрение в дължината на четене на технологиите за секвениране от трето поколение донесе нови възможности за сглобяване на сложни геноми, като тези с висока хетерозиготност, високо съотношение на повтарящи се региони, полиплоиди и т.н. разрешаване на повтарящи се елементи, региони с анормално съдържание на GC и други силно сложни региони.
Платформа: PacBio Sequel II /Nanopore PromethION P48/ Illumina NovaSeq6000